圓二色光譜儀的原理
圓二色光譜儀的原理基于圓二色性(Circular Dichroism, CD),這是一種光學(xué)現(xiàn)象,當(dāng)平面偏振光通過具有旋光活性的介質(zhì)時,由于介質(zhì)中同一種旋光活性分子存在手性不同的兩種構(gòu)型(如左旋和右旋),它們對平面偏振光所分解成的右旋和左旋圓偏振光的吸收不同,從而產(chǎn)生圓二色性。具體來說,當(dāng)分子與圓偏振光相互作用時,吸收光的旋轉(zhuǎn)方向和強度會發(fā)生改變,這種差異就形成了圓二色光譜。這種原理使得圓二色光譜儀能夠分析物質(zhì)的旋光性,進(jìn)而研究物質(zhì)的構(gòu)象和結(jié)構(gòu)。
圓二色光譜儀的使用注意事項
樣品準(zhǔn)備:
確保樣品的純度和濃度。樣品的純度對于獲得高質(zhì)量的圓二色譜圖至關(guān)重要,避免雜質(zhì)對譜圖的干擾。同時,合適的樣品濃度也是獲得良好信噪比的關(guān)鍵因素。
選擇合適的溶劑來溶解樣品,并保持其穩(wěn)定性。
儀器設(shè)置:
設(shè)置好合適的光強、光路和溫度條件。這些條件對于獲得準(zhǔn)確的譜圖至關(guān)重要。
在標(biāo)準(zhǔn)操作時,譜帶寬度通常選為1 nm。對于高分辨率測量,可能需要使用較窄的狹縫寬度,但此時要注意光電倍增管的電壓較高,譜的信噪比可能會變差。
操作規(guī)范:
不亂按鍵盤,操作人員應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,不得進(jìn)入規(guī)定以外的任何程序或按規(guī)定以外的任何功能鍵。
在處理樣品和儀器部件(如火花臺板、圓石英墊片和玻璃套管)時要輕拿輕放,避免劃傷或破碎。
壓樣品夾子時要垂直,確保樣品夾緊后再按激發(fā)鍵,避免在激發(fā)時觸摸或抬起樣品夾。如果遇到激發(fā)時聲音很大,應(yīng)該按停止鍵,不允許直接抬起樣品夾,以防電路板燒毀。
儀器維護:
儀器發(fā)生故障時應(yīng)及時報告技術(shù)人員處理。儀器發(fā)生異?,F(xiàn)象時,應(yīng)馬上關(guān)閉電源,保護現(xiàn)場并及時上報。
火花臺應(yīng)定期清理,以防激發(fā)樣品后產(chǎn)生的黑色沉積物導(dǎo)致電極與火花臺之間短路。
非崗位人員不得隨意進(jìn)入機房,機房內(nèi)禁止吸煙、吃食物等可能污染或損壞儀器的行為。
數(shù)據(jù)處理:
橢圓率和摩爾橢圓率都依賴于測量條件,因此溫度、波長和樣品濃度等測量條件應(yīng)特別注明。
在分析圓二色光譜圖時,應(yīng)注意識別可能的假象,如熒光或雜散光引起的干擾。
安全注意事項:
在操作過程中應(yīng)注意個人安全,避免觸電、燙傷等意外事故的發(fā)生。
遵守實驗室的安全規(guī)定和操作規(guī)程,確保實驗環(huán)境的整潔和安全。
通過以上注意事項的遵守和實施,可以確保圓二色光譜儀的正常運行和實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。